視神經脊髓炎譜系疾病（NMOSD）是一種主要累及青壯年人群，復發率和致殘率*的中樞神經系統炎性脫髓鞘疾病。2019年9月27日NMPA批準了水通道蛋白（AQP4）抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）的上市，用于體外定量測定人血清中水通道蛋白抗體（AQP4 Ab）的含量。該試劑盒（RSR, AQP4 Ab Version 2）來自天津阿斯爾生物科技有限公司，注冊號：國械注進20192400461。

2021年12月中國免疫學會神經免疫分會組織國內專家重磅發布了2021版《中國視神經脊髓炎譜系疾病診斷與治療指南》（以下簡稱《指南》），在實驗室診斷方面，較前版有較大的補充，重申了AQP4-IgG在診斷中的重要性。AQP4-IgG是具有高度特異性的診斷標志物，特異度高達90%，敏感度約為70%。

指南中所推薦的CBA和流式細胞術大多數為實驗室檢測方法，高度依賴檢測人員的操作水平（細胞轉染水平，不同轉染技術的選取，檢測結果判讀等）。

2021版《指南》較2016年版明確了抗體定量檢測的意義，并充分肯定了ELISA法獲得的定量結果對制定臨床診療方案的輔助意義。

我們查閱了指南的征引文獻【53-55】，進一步分析文章的數據和結論來源。

靈敏度： 三例文獻中ELISA法的靈敏度最高，優于間接免疫熒光(IIF)法、免疫組化(IHC)法和基于細胞的檢測(CBA)法。

特異性：綜合特異性排名：IIF=ELISA=CBA≥IHC

●   NMOSD疾病組（108例）：

66例視神經脊髓炎（NMO），25例長節段橫貫性脊髓炎（LETM），14例復發性視神經炎（ON），3例非長節段橫貫脊髓炎/視神經炎（NETM/ON）

●   對照組（153例）：

109例多發性硬化（MS），39例其他神經系統疾病（OND）, 5例健康對照(HC)

●   ELISA法

RSR, AQP4 Ab Version 1

現款2代試劑盒全面優于文中1代性能

檢測全部樣本（261例）

●   免疫組化法

檢測部分樣本（207例）

1. 靈敏度：

ELISA法靈敏度高。ELISA法靈敏度在下列疾病亞組（單發或多發癥狀患者）中均高于IHC法：50/66例(75.8%)NMO患者，17/25例(68%)LETM患者，3/14例(21.4%)ON患者，2/3例(66.7%)ON合并非廣泛性橫斷脊髓炎患者。在針對性更強的NMOSD患者中，同時接受雙方法學檢測的結果中ELISA法仍維持更高的陽性率（10例ELISA檢測單陽性，3例IHC檢測單陽性）。

2. 特異性：

數據證實ELISA法特異性高于IHC法：在對照組中，151/153例(98.7%)患者呈AQP4抗體陰性（ELISA法），116/118例（98.3%）患者呈AQP4抗體陰性（IHC法）。

3. 重復性：

ELISA在AQP4抗體檢測方面上具有很好的批內和批間重復性。

4. 定量意義：

血清中AQP4抗體濃度與疾病活躍程度相關(p＜0.00001)。

注：m =男性；f =女性；pLR =陽性似然比；nLR =陰性似然比；n.d.=不確定；n.a.=不適用

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● NMOSD疾病組（54例）：

9例NMO，32例視神經炎（ON），13例橫貫性脊髓炎（TM）

● 疾病對照組（70例）：

10例MS（包括兩例視神經脊髓OSMS），60例OND

●   組織間接免疫熒光法(IIF-tissue)

小鼠小腦組織

●   CBA法(IIF-AQP4)

轉染人AQP4的HEK293細胞 (EUROIMMUN, Germany)

●   ELISA法

商用檢測試劑盒（DLD diagnostika GmbH, Germany）

1. 靈敏性：

ELISA法優于IIF-tissue法和CBA法。

ELISA法在NMOSD疾病組（11/54，20.4%）中和NMO疾病亞組（5/9，55.6%）中陽性檢出率最高。

2. 特異性：

在疾病對照組中，三種方法的抗體陰性檢出例數僅相差一例，總體特異性相差不大（IIF-tissue法為68/70，97.1%；CBA法與ELISA法特異性一樣，為67/70，95.7%）。

表2 三種方法在不同疾病組患者中AQP4抗體的血清陽性率

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●   NMOSD疾病組（54例）：

24例NMO，24例LETM，13例ON，3例脊髓炎（Myelitis）

●   對照組（27例）：

17例MS，10例健康供血者（HS）

●   ELISA法

RSR, AQP4 Ab Version 2

全自動檢測系統（SkyLAB 752）

●   組織間接免疫熒光法（IIF-tissue）

基于靈長類組織

1. 方法學間一致性強：

ELISA檢測結果與參照方法IIF-tissue法的一致性達*。

2. 臨床準確度：

NMO患者中檢測AQP4抗體的靈敏度為83.3%，特異性為*。

3. 定量意義：

NMO患者的AQP4抗體中位數濃度高于LETM患者（p=0.00006）或其他NMOSD患者及對照組(p < 0.0001)。

4. 文章結論：

新款ELISA試劑盒在全自動化的系統上體現出較高的靈敏度和*特異性，精密度高（CV值小），可以提供客觀的定量結果。

表3 患者和對照組的人口統計學、臨床和血清學特征

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